Greece
   
Include All CSL Behring Country Sites

Κλασματοποίηση (τμηματοποίηση)είναι η διαδικασία απομόνωσης, κάθαρσης και συμπύκνωσης των πρωτεϊνών από το ανθρώπινο πλάσμα. Περιλαμβάνει μεταβολή των συνθηκών (π.χ. της θερμοκρασίας, της συγκέντρωσης αλκοόλης, της ισχύος των ιόντων ή του pH), έτσι ώστε οι πρωτεΐνες να καταστούν αδιάλυτες και να καθιζήσουν.

Οι πρωτεΐνες της CSL Behring που προέρχονται από πλάσμα παράγονται με τη χρήση μιας τροποποιημένης μεθόδου κλασματοποίησης κατά Cohn ή Kistler – Nitschmann. Αρχικά το κατεψυγμένο πλάσμα αποψύχεται και συγκεντρώνεται. Οι πρωτεΐνες, οι οποίες είναι αδιάλυτες στις χαμηλές θερμοκρασίες, κυρίως η FVIII, vWF και FI (ινωδογόνο), διαχωρίζονται με φυγοκέντρηση και παραμένουν στο κρυοκαθίζημα.

Στο επόμενο βήμα, οι παράγοντες της πήξεως που εξαρτώνται από την βιταμίνη Κ (FII, FVII, FIX και FX) προσροφούνται σε μια ρητίνη χρωματογραφίας από το υπερκείμενο υγρό στρώμα. Με την προσθήκη αλκοόλης, οι πρωτεΐνες του παράγοντα ΧΙΙΙ καθιζάνουν και απομακρύνονται. Κατόπιν, μέσω αλλαγής του pH και της αύξησης της συγκέντρωσης της αλκοόλης, καθιζάνουν ο αναστολέας της Άλφα-1 πρωτεϊνάσης και η λευκωματίνη.


Η κλασματοποίηση περιλαμβάνει τις ακόλουθες διαδικασίες:

  • Καθίζηση και προσρόφηση
  • Εν τω βάθει διήθηση
  • Φυγοκέντρηση
  • Χρωματογραφία

Η πρώτη διαδικασία, η καθίζηση, είναι ο σχηματισμός στερεού υπολείμματος εντός ενός υγρού κατά την διάρκεια μιας χημικής (ή φυσικής) αντίδρασης. Το στερεό μέρος φιλτράρεται. Η επιλεκτική καθίζηση συγκεκριμένων πρωτεϊνών αποτελεί έναν αποτελεσματικό τρόπο διαχωρισμού των διαφόρων πρωτεϊνών. Η προσρόφηση εμφανίζεται όταν ένα αέριο ή υγρό διάλυμα συγκεντρώνεται στην επιφάνεια ενός στερεού σχηματίζοντας ένα μοριακό λεπτό στρώμα (το προσρόφημα). Τα προσροφήματα μεταφέρονται επιλεκτικά από την υγρή φάση προς την επιφάνεια δυσδιάλυτων, άκαμπτων σωματιδίων που αιωρούνται εντός ενός δοχείου ή είναι συσσωρευμένα σε μία στήλη.

Κατά την διάρκεια της δεύτερης διαδικασίας, της εν τω βάθει διήθησηςτο καθίζημα παρακρατείται από το υπερκείμενο υγρό στρώμα. Η τρίτη διαδικασία, η φυγοκέντρηση, διαχωρίζει τα μίγματα με τη χρήση της φυγόκεντρης δύναμης, ενώ η τέταρτη διαδικασία, η χρωματογραφία, επιφέρει τον διαχωρισμό των πρωτεϊνικών μιγμάτων μέσω της διέλευσης της υγρής φάσης του μίγματος δια μέσου της στερεάς φάσης με αποτέλεσμα τον διαχωρισμό και την απομόνωση της επιθυμητής πρωτεΐνης από τις άλλες πρωτεΐνες του μίγματος. Τυπικά αυτό επιτυγχάνεται μέσω της δέσμευσης των ιόντων της πρωτεΐνης από μια πορώδη ρητίνη, και θεωρείται σαν μια ήπια διαδικασία απομόνωσης της πρωτεΐνης.

Αυτές οι διαδικασίες κάθαρσης δύνανται να ελαττώσουν το ιϊκό φορτίο. Παρ’ όλα αυτά, για μεγαλύτερη ασφάλεια η CSL Behring εφαρμόζει επιπρόσθετα στάδια αδρανοποίησης/εξάλειψης των ιών, που περιλαμβάνουν την παστερίωση και την ιϊκή διήθηση.